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使用血清前需要對其進(jìn)行滅活嗎？
點(diǎn)擊次數(shù)：2078 更新時(shí)間：2019-11-15
血清：血液凝固析出的淡黃色透明液體。如將血液自血管內(nèi)抽出，放入試管中，不加抗凝劑，則凝血反應(yīng)被激活，血液迅速凝固，形成膠凍。其周圍所析出之淡黃色透明液體即為血清，也可于凝血后經(jīng)離心取得。在凝血過程中，纖維蛋白原轉(zhuǎn)變成纖維蛋白塊，所以血清中無纖維蛋白原，這一點(diǎn)是與血漿zui大的區(qū)別。而在凝血反應(yīng)中，血小板釋放出許多物質(zhì)，各凝血因子也都發(fā)生了變化。這些成分都留在血清中并繼續(xù)發(fā)生變化，如凝血酶原變成凝血酶，并隨血清存放時(shí)間逐漸減少以至消失。這些也都是與血漿區(qū)別之處。但大量未參加凝血反應(yīng)的物質(zhì)則與血漿基本相同。為避免抗凝劑的干擾，血液中許多化學(xué)成分的分析，都以血清為樣品。
對于大多數(shù)細(xì)胞的培養(yǎng)而言，是不需要的加熱滅活的。但在免疫學(xué)研究、ES細(xì)胞培養(yǎng)、昆蟲細(xì)胞和平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)推薦使用滅活血清。加熱血清可以滅活血清中被激活的補(bǔ)體，但同時(shí)也會(huì)破壞熱不穩(wěn)定的蛋白。熱滅活血清對細(xì)胞的生長只有微小的促進(jìn)作用，甚至?xí)驗(yàn)闇缁畈划?dāng)，破壞血清的品質(zhì)，而抑制細(xì)胞的生長。
按照正確的解凍方式*解凍血清，使其恢復(fù)到室溫。將血清分裝成50mL進(jìn)行滅活。對于一次需要滅活500mL的操作，可以將一個(gè)相同體積的容器放置在水浴鍋中，中間插入溫度計(jì)，作為參考。當(dāng)溫度達(dá)到56℃時(shí)，加熱30min進(jìn)行滅活。
正常血清有時(shí)候中會(huì)出現(xiàn)一些絮狀的沉淀，這些絮狀物一般是纖維蛋白和脂蛋白的沉淀，不會(huì)影響血清的品質(zhì)，可以通過在4℃混勻后靜置1h，400g離心5min去除。
